حاسبة تركيز البروتين

الفئة: علم الأحياء
- يوليو 10, 2025
| |
القيم النموذجية تتراوح من 0.5 إلى 2.0
تحتوي الكوات القياسية على طول مسار 1 سم
إذا تم تخفيف العينة قبل القياس (على سبيل المثال، 5 = تخفيف 1:5)

يتم تحديد تركيز البروتين باستخدام الامتصاص عند 280 نانومتر (A280) وفقًا لقانون بير-لامبرت:

\[ C = \frac{A}{\epsilon \times l} \]

حيث:

  • \( C \) = تركيز البروتين (ملغ/مل)
  • \( A \) = الامتصاص عند 280 نانومتر
  • \( \epsilon \) = معامل الانقراض (لتر·غ⁻¹·سم⁻¹)
  • \( l \) = طول مسار الكوفيت (سم)

ما هو حاسبة تركيز البروتين؟

تساعد حاسبة تركيز البروتين في تحديد تركيز البروتين باستخدام طرق مختلفة، بما في ذلك:

  • الامتصاص عند 280 نانومتر (A280): طريقة سريعة وغير مدمرة تعتمد على الأحماض الأمينية العطرية.
  • اختبار برادفورد: طريقة لونية تستخدم ربط الصبغة.
  • اختبار BCA (حمض البيكينشونيك): طريقة تعتمد على اختزال النحاس والكشف اللوني.
  • اختبار لوري: نهج راسخ يستخدم تفاعلات البروتين-النحاس.

كيفية استخدام الحاسبة

اتبع هذه الخطوات لحساب تركيز البروتين:

  • اختر طريقة القياس (A280، برادفورد، BCA، أو لوري).
  • أدخل القيم المطلوبة مثل الامتصاص، عامل التخفيف، ومعامل الانقراض (إذا لزم الأمر).
  • إذا كنت تستخدم طريقة منحنى قياسي (برادفورد، BCA، أو لوري)، أدخل معلمات المنحنى.
  • اضغط على زر "احسب" للحصول على نتيجة التركيز.

فوائد استخدام الحاسبة

  • يوفر الوقت من خلال أتمتة حسابات التركيز.
  • يدعم طرق قياس متعددة للمرونة.
  • يتضمن حاسبة للتخفيف لإعداد تركيزات محددة.
  • يقلل من الأخطاء البشرية في الحسابات اليدوية.

الأسئلة الشائعة

1. ما مدى دقة طريقة الامتصاص (A280)؟

تعتبر طريقة A280 دقيقة بشكل عام للبروتينات النقية ولكن يمكن أن تتأثر بالملوثات مثل الأحماض النووية.

2. هل يمكنني استخدام اختبار برادفورد لجميع البروتينات؟

يعمل اختبار برادفورد بشكل جيد لمعظم البروتينات ولكنه قد يعطي نتائج متغيرة اعتمادًا على تركيبة البروتين.

3. ما هي ميزة اختبار BCA؟

تعتبر طريقة BCA أكثر توافقًا مع المنظفات ولها نطاق خطي أوسع من برادفورد.

4. كيف أختار معامل الانقراض الصحيح لـ A280؟

استخدم القيم المنشورة للبروتينات المعروفة، أو احسب معامل الانقراض بناءً على تركيبة الأحماض الأمينية.

5. لماذا أحتاج إلى عامل التخفيف؟

إذا تم تخفيف عينة قبل القياس، يجب عليك ضرب التركيز المحسوب في عامل التخفيف للحصول على التركيز النهائي الصحيح.